Microscopia confocal de reflectância como suporte para a avaliação clínica das alterações do envelhecimento cutâneo

Data de recebimento: 11/09/2015
Data de aprovação: 23/09/2015
Suporte Financeiro: Fapesp
Conflito de Interesses: Nenhum

Abstract

Introdução: A microscopia confocal de reflectância a laser tem sido considerada ferramenta de extensa aplicação na clínica dermatológica, representando-se como revolução no diagnóstico de doenças de pele e avaliação de características cutâneas, por permitir a visualização em nível celular com resolução quase histológica de características celulares e teciduais por um método não invasivo, em tempo real. Objetivo: Avaliar as características morfológicas e estruturais do envelhecimento cutâneo na epiderme e derme papilar por meio da microscopia confocal de reflectância a laser. Métodos: 40 voluntárias de fototipo II, III e IV foram selecionadas e divididas em dois grupos de idade: pele jovem (18-35 anos) e pele envelhecida (40-65 anos). A avaliação das características celulares das diferentes camadas da pele foi realizada utilizando o microscópio confocal de reflectância a laser Vivascope 1500. Resultados: Pela análise da microscopia confocal, foi observado padrão de pigmentação irregular, queratinócitos distribuídos irregularmente, achatamento da junção dermoepidérmica, presença de fibras de colágeno deterioradas e elastose solar na pele envelhecida. Conclusões: A microscopia confocal de reflectância a laser é técnica de grande aplicação para avaliar as características morfológicas e estruturais do envelhecimento cutâneo no nível de epiderme e derme papilar.

Keywords: MICROSCOPIA CONFOCAL; ENVELHECIMENTO DA PELE; EPIDERME; DERMATOLOGIA

INTRODUÇÃO

A microscopia confocal de reflectância (MCR) a laser tem sido considerada ferramenta de extensa aplicação na clínica dermatológica, representando-se como uma revolução no diagnóstico de doenças de pele e avaliação de características cutâneas, por permitir a visualização em nível celular com resolução quase histológica de características celulares e teciduais por um método não invasivo, em tempo real.^1-3

Muitos estudos relatam que MCR é técnica adequada e confiável para a caracterização e quantificação das características estruturais da epiderme e derme superior e supera as desvantagens da avaliação histopatológica. As imagens obtidas pelo microscópio confocal permitem a avaliação de características cutâneas tais como espessura das diferentes camadas da epiderme, organização dos queratinócitos, alterações no padrão de pigmentação, quantidade de papilas dérmicas por área, formato dos contornos das papilas dérmicas, tamanho das glândulas sebáceas, e estrutura da rede de colágeno, contagem e tamanho de poros e microcomedões, e avaliação de sinais primários de irritação cutânea.^4-8

Devido à grande possibilidade de aplicação da técnica, a elucidação e interpretação das imagens da MCR relacionadas ao envelhecimento cutâneo fornecerão subsídios para sua aplicação na clínica dermatológica a fim de avaliar as alterações cutâneas decorrentes do envelhecimento.

 

OBJETIVO

O objetivo deste trabalho foi avaliar as características morfológicas e estruturais do envelhecimento cutâneo na epiderme e derme papilar por meio da MCR a laser.

 

MÉTODOS

Para este estudo prospectivo e comparativo, aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa envolvendo Seres Humanos da Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto - USP (ANEXO I), 40 voluntárias de fototipo II, III e IV foram selecionadas e divididas em dois grupos, segundo a idade: 20 voluntárias com pele jovem (18-35 anos), e 20 voluntárias com pele envelhecida (40-65 anos).⁹

As voluntárias foram orientadas sobre os objetivos e métodos da pesquisa e, concordando em participar da mesma, assinaram o Termo de Consentimento Livre e Esclarecido (CEP/ FCFRP - Protocolo nº 273/2012). O estudo foi conduzido na Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto - USP.

A avaliação das características celulares das diferentes camadas da pele foi realizada utilizando o microscópio confocal de reflectância a laser Vivascope 1500, que utiliza uma fonte a laser com comprimento de onda de 830nm e uma objetiva de imersão com capacidade de detectar 20 imagens por segundo.⁴

As imagens microscópicas foram realizadas utilizando o sistema de obtenção de imagens, Vivastack, constituído por múltiplas imagens confocais em profundidades sucessivas em determinado local do tecido, obtendo-se imagens a cada 1,5µm até a profundidade de 37,5µm, a cada 3µm até a profundidade de 112,5µm e a cada 4,5µm até a profundidade de 132,5µm.^10,11 As imagens foram colhidas na região periorbital da face das voluntárias.

 

RESULTADOS

Em relação ao padrão da epiderme, observa-se uma desordem do padrão de "favo de mel" com pleomorfismo de tamanho e forma de queratinócitos e também pigmentação irregular na pele envelhecida, quando comparada ao aspecto normal da pele jovem (Figura 1). Quanto à pigmentação, observa-se que há um acúmulo de melanina nos queratinócitos, o que caracteriza um padrão de pigmentação irregular (Figura 2).

O padrão da junção dermoepidérmica apresenta-se completamente alterado na pele envelhecida (Figura 3). Observa-se que ocorre perda das papilas dérmicas, e consequentemente há um achatamento da epiderme. Na derme papilar, a pele jovem apresenta fibras de colágeno finas e altamente refringentes, enquanto na pele envelhecida, as fibras são pouco visíveis e apresentam a aparência encolhida e amorfa (Figura 4). Em alguns casos, é possível observar a presença de elastose solar na pele envelhecida (Figura 5).

Pela análise da microscopia confocal, foram observados padrão de pigmentação irregular, queratinócitos distribuídos irregularmente, achatamento da junção dermoepidérmica, presença de fibras de colágeno deterioradas e elastose solar severa na pele envelhecida.

 

DISCUSSÃO

A epiderme envelhecida apresenta características morfológicas e estruturais distintas, com queratinócitos desorganizados, decorrente da menor renovação celular nesse tipo de pele. Além disso, a técnica apresenta excelente aplicação para a avaliação da pigmentação irregular na epiderme, uma vez que, pelo princípio da técnica, a melanina fornece grande contraste, facilitando a análise e interpretação das imagens.¹²

As características morfológicas e estruturais da junção dermoepidérmica também são relacionadas ao envelhecimento, sendo esse fato decorrente do envelhecimento intrínseco e agravado com a exposição solar prolongada.¹³ A MCR a laser mostrou-se ferramenta de grande utilidade para avaliar a integridade e morfologia da junção dermoepidérmica e suas alterações decorrentes do envelhecimento, sendo possível, além disso, avaliar a profundidade das papilas dérmicas, por meio da análise das imagens consecutivas.

As imagens obtidas por MCR da derme papilar no presente estudo também foram observadas por outros grupos de pesquisa em que fibras colágenas espessas e amorfas na derme são observadas em indivíduos mais velhos, com perda de fibras de colágeno finas reticuladas, comuns em indivíduos mais jovens.^6,7,14

Com o envelhecimento, as diferenças entre o envelhecimento cronológico e o fotoenvelhecimento são observadas na matriz extracelular, revelando expressão reduzida de genes de colágeno intersticial no envelhecimento intrínseco e aumento da expressão de genes do tecido elástico no fotoenvelhecimento.¹⁵

O microscópio confocal de refletância a laser permite a avaliação de características clínicas e subclíncias do fotoenvelhecimento, sendo ferramenta de grande utilidade para a detecção precoce de características cutâneas indesejáveis e fornecendo subsídios para a prescrição de tratamentos eficazes e seguros para a prevenção e melhoria do envelhecimento cutâneo. Portanto, é técnica útil para auxiliar a análise de características cutâneas que incomodam o paciente pelo caráter inestético, e também para possível detecção de características morfológicas e estruturais que podem estar relacionadas às disfunções cutâneas.

 

CONCLUSÃO

A MCR a laser é técnica de grande aplicação para avaliar as características morfológicas e estruturais do envelhecimento cutâneo na epiderme e na derme papilar.

 

Referências

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Trabalho realizado na Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto da Universidade de São Paulo (FCFRP/ USP) - Ribeirão Preto (SP), Brasil.